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第一章 导言1

一、生物技术主要概念及技术简介1

二、生物技术实验室安全性、药品试剂配制及实验报告要求3

三、生物技术常用实验仪器及其使用方法7

参考文献16

第二章 植物细胞工程实验技术17

实验一 培养基的配制、消毒与接种17

实验二 植物愈伤组织诱导及分化培养24

实验三 花药培养28

实验四 细胞悬浮培养31

实验五 原生质体的游离、培养与融合34

实验六 植物细胞的生长计量技术39

实验七 植物快速无性繁殖42

实验八 细胞大规模培养及人工种子制备46

实验九 农杆菌介导的植物遗传转化50

参考文献53

第三章 微生物工程实验技术54

实验一 培养基的配制及灭菌54

实验二 菌种的分离纯化60

实验三 微生物形态的观察和革兰染色法62

实验四 稀释平板计数法和细菌生长曲线的测定64

实验五 发酵罐的构造与实罐灭菌67

实验六 谷氨酸发酵工程系列实验71

Ⅰ谷氨酸菌种的制备72

Ⅱ谷氨酸的中糖发酵及控制74

Ⅲ谷氨酸发酵过程还原糖含量的测定75

Ⅳ谷氨酸含量的测定与等电回收77

实验七 啤酒发酵工程系列实验78

Ⅰ协定法糖化试验79

Ⅱ啤酒酵母纯种分离80

Ⅲ啤酒酵母的计数81

Ⅳ啤酒酵母的质量检查83

Ⅴ啤酒酵母的扩大培养85

Ⅵ麦芽汁的制备85

Ⅶ糖度的测定87

Ⅷ啤酒主发酵88

Ⅸ酸度和pH值的测定89

Ⅹ酒精度的测定及原麦芽汁浓度的计算90

Ⅺ色度的测定93

Ⅻ苦味质的测定94

ⅩⅢ啤酒质量品评95

参考文献98

第四章 蛋白质、核酸的提取与分离99

实验一 酪蛋白的分离提取99

实验二 溶菌酶的提纯与结晶101

实验三 植物基因组DNA提取103

实验四 质粒DNA的分离提取104

实验五 植物RNA提取106

参考文献108

第五章 色谱及电泳技术110

实验一 薄层层析法进行转氨酶活性鉴定110

实验二 气相色谱内标法测定丁醇的含量112

实验三 高效液相色谱法（HPLC）分析多维片或饮料中Vc和VB的含量114

实验四 DNA琼脂糖凝胶电泳116

实验五 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量118

实验六 非同位素银染DNA测序技术122

实验七 纤维素薄膜电泳分离血清蛋白及永久胶片制作129

参考文献133

第六章 聚合酶链式反应（PCR）135

实验一 常规PCR法扩增目的潮酶素基因片段135

实验二 PCR法制备潮酶素基因探针138

实验三 逆转录PCR（RT-PCR）139

实验四 随机引物PCR141

参考文献143

第七章 分子杂交技术144

实验一 核酸分子杂交技术144

实验二 Western杂交147

参考文献149

第八章 基因重组及基因文库构建150

实验一 DNA酶切、片段回收与重组连接150

实验二 重组体DNA遗传转化与克隆筛选153

实验三 真核生物基因组文库的构建155

实验四 cDNA文库的构建158

参考文献165

附录167

附录一 常用激素的溶解167

附录二 常用消毒剂的使用和效果167

附录三 植物组织培养常用的培养基配方168

附录四 Kao和Michayluk的KM8P培养基169

附录五 细胞筛孔径（μm）与目换算表169

附录六 GUS染色方法169

附录七 主要溶液（母液）及缓冲液配制170

附录八 常见市售酸碱的浓度172

附录九 基因组文库载体的种类和特征172

附录十 生命科学常用实验仪器名称中英文对照表173

附录十一 几种主要的限制性核酸内切酶及其作用位点174

附录十二 几种主要的质粒载体的酶切位点及其选择标记175

附录十三 实验报告参考式样178

附录十四 有关警告标志181